消毒滅菌對(duì)細(xì)胞株培養(yǎng)的重要性

　　細(xì)胞株嚴(yán)格的消毒滅菌對(duì)保證細(xì)胞培養(yǎng)的成功是極為重要的，其方法分為物理法和化學(xué)法兩類。前者包括干熱、濕熱、濾過、紫外線及射線等，后者主要指使用化學(xué)消毒劑等。

　　①熱滅菌：玻璃器皿，160~170℃，90~120min或180℃45~60min。

　　②蒸氣滅菌：用于玻璃器皿、濾器橡膠塞、解剖用具、耐熱塑料器具、受熱不變性的溶液等，不同物品其有效滅菌壓力和時(shí)間不同，如培養(yǎng)用液、橡膠制品、塑料器皿等用68kPa(115℃)高壓滅菌10min;布類、玻璃制品、金屬器械等用103kPa(121.3℃)高壓滅菌15~20min。

　　③濾過除菌：適于含有不耐熱成分的培養(yǎng)基和試劑的除菌，用孔徑為0.22μm微孔濾膜可除去細(xì)菌和霉菌等，用此濾膜過濾兩次，細(xì)胞株可使支原體達(dá)到某種程度的去除，但不能除去病毒。

　　④紫外線：紫外線的波長為200~300nm，zui強(qiáng)是在254 nm，6~15平方米zui少一只紫外燈，高度要在2.5m以下，濕度45%~60%，桿菌效果好，球菌次之，霉菌、酵母菌zui差，實(shí)驗(yàn)前應(yīng)不低于30分鐘的照射時(shí)間。

　　⑤熏蒸消毒：當(dāng)遇有細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)多次污染，或?qū)嶒?yàn)室兩個(gè)月一次的常規(guī)消毒，均可用高錳酸鉀5~7.5g，加甲醛(40%)10~15ml，混合放入一開放容器內(nèi)，立即可見白色甲醛煙霧，消毒房間需封閉24小時(shí)，致少4小時(shí)以上。

　　⑥煮沸消毒：緊密情況時(shí)使用，金屬器械和膠蹇在水中煮20~30分鐘，趁熱傾去水分即可使用。

　　⑦化學(xué)消毒：化學(xué)藥品消毒滅菌法是應(yīng)用能殺死微生物的化學(xué)制進(jìn)行消毒滅菌的方法。實(shí)驗(yàn)室桌面、用具及洗手用的溶液均常用化學(xué)藥品進(jìn)行消毒殺菌。細(xì)胞株常用的有：2%煤酚皂溶液(來蘇爾)、0.25%新潔爾滅、3~5%甲醛溶液、75%酒精。