鑒別ATCC細胞株真偽的方法

　　ATCC細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養物稱為ATCC細胞株，也就是說，ATCC細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群。ATCC細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。

　　原代培養物經傳代成功后即為細胞系，由原先存在于原代培養物中的細胞世系所組成。如果不能繼續傳代，或傳代次數有限， 可稱為有限細胞系，如可以連續培養， 則稱為連續細胞系，培養50代以上并無限培養下去。 所以ATCC細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質或標志的培養細胞。從培養代數來講，可培養到40-50代。ATCC細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。對于人類腫瘤細胞，在體外培養半年以上，生長穩定，并連續傳代的即可稱為連續性株或系。

　　鑒別ATCC細胞株真偽的方法：

　　一．利用干擾實驗即可辨別ATCC細胞株是否檢測目的抗原，方法如下：

　　(1) 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液(2) 37℃孵育15分鐘后，代替原試劑盒中的檢測抗體(3) 后續操作按照試劑盒說明書進行，加檢測抗體、酶復合物和底物(4) 實驗完畢后，檢測其標準曲線，如果標準曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配，試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原，該試劑盒為偽劣假造ATCC細胞株。 (5) 如果標準曲線無線性，則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾，影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用，則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。

　　二． 如果購買了兩盒同一公司的ATCC細胞株A和B，利用交叉實驗即可辨別ATCC細胞株是否造假，方法如下：

　　(1) 取出購買的試劑盒A的包被板兩條。

　　(2) 一條包被板加試劑盒A的標準品做標準曲線。

　　(3) 另一條包被板加試劑盒B的標準品做標準曲線。

　　(4) 后續操作按照試劑盒說明書進行，加檢測抗體、酶復合物和底物。

　　(5) 實驗完畢后，檢測兩條標準曲線，如果兩條標準曲線一致則說明兩個ATCC細胞株檢測的同一個指標而非A和B，即該試劑盒為偽劣假造ATCC細胞株。

　　(6) 如果兩條標準曲線不一致則說明兩個ATCC細胞株檢測的不同指標，試劑盒A只能檢測A，不能檢測B，即該試劑盒為正常的ATCC細胞株。