如何選擇合適的細(xì)胞培養(yǎng)板

　　細(xì)胞培養(yǎng)的規(guī)模可大可小，你既可以使用生物反應(yīng)器，也可以使用培養(yǎng)瓶或多孔板。如今，利用多孔板的細(xì)胞培養(yǎng)模式正倍受青睞，因?yàn)檫@有助于研究多個動態(tài)變量，減少實(shí)驗(yàn)時間，并節(jié)約昂貴的試劑。除了標(biāo)準(zhǔn)的高通量微孔板，還有一些特殊的微孔板被開發(fā)出來，助力3D和器官型細(xì)胞培養(yǎng)。

　　市場上的細(xì)胞培養(yǎng)板可不少，如何選擇合適的呢？我們需要重點(diǎn)考慮孔的數(shù)量、孔的形狀、微孔板顏色以及表面處理。

　　1. 孔的數(shù)量

　　大多數(shù)用戶在組織培養(yǎng)瓶上開始組織培養(yǎng)。不過，許多應(yīng)用也需要多孔板。理想的數(shù)量嘛，取決于你所需的通量水平，以及是否有機(jī)器人的協(xié)助。*手動地向96孔板中添加試劑，這并非不可行，但有電動移液器或機(jī)器人的幫助當(dāng)然更好。擴(kuò)展到384孔板，就更加需要機(jī)器人，而1536孔板更是需要。當(dāng)然，高密度多孔板的挑戰(zhàn)還在于分析小型化。

　　2. 孔的形狀

　　孔的底部可以選擇平的、圓的，或錐形的，這取決于細(xì)胞類型和下游應(yīng)用。對于傳統(tǒng)的2D細(xì)胞培養(yǎng)（如HeLa或MDCK細(xì)胞），特別是需要對培養(yǎng)物進(jìn)行成像或分光光度測定，通常平底（F-bottom）。對于不存在接觸抑制的細(xì)胞，弧形底（C-bottom）也不錯。圓底（U-bottom）適合懸浮培養(yǎng)（如球體細(xì)胞培養(yǎng)），因?yàn)閳A的表面讓細(xì)胞難以附著和生長。而錐形底很少用于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，但在細(xì)胞沉淀時可能有用。

　　3. 微孔板的顏色

　　多孔板的顏色也與應(yīng)用息息相關(guān)。如果用相差顯微鏡或肉眼觀察細(xì)胞，可選擇透明的多孔板。不過，對于可見光光譜以外的應(yīng)用（如冷光或熒光），有顏色的多孔板（如白色或黑色）則是必需的。在使用從頂部讀數(shù)的儀器時，底部應(yīng)該是不透明的，而使用顯微鏡或底部讀數(shù)的儀器時，應(yīng)選擇底部透明的多孔板。冷光樣品通常選擇白色表面，以便zui大限度提高信號的反射率，而大于300 nm的熒光應(yīng)用通常使用黑色表面，以吸收激發(fā)信號。有顏色的表面還可以防止相鄰孔之間的信號串?dāng)_。

　　4. 表面處理

　　選擇哪種細(xì)胞表面處理，這要取決于你培養(yǎng)的是懸浮細(xì)胞還是貼壁細(xì)胞。對于懸浮或球體細(xì)胞培養(yǎng)，建議使用BRAND inertGrade?微孔板，它經(jīng)過的疏水凝膠處理，可抑制細(xì)胞或蛋白附著。對于輕松附著的貼壁細(xì)胞（如HeLa），標(biāo)準(zhǔn)的組織培養(yǎng)表面就足夠了。對于那些貼壁有困難的細(xì)胞（如原代細(xì)胞），或涉及到嚴(yán)格洗滌的應(yīng)用，建議使用BRAND的cellGrade?微孔板。這種*的表面與多聚賴氨酸處理的表面相似，但它不是涂層，而是塑料性質(zhì)的物理變化，因此不需要冷藏。對于那些敏感細(xì)胞或血清量減少的細(xì)胞，建議使用cellGrade? plus表面。

　　zui后，當(dāng)然不能忽視培養(yǎng)容器的質(zhì)量。這不僅僅指微孔板，還包括與細(xì)胞接觸的一切，比如吸頭，以避免細(xì)胞污染或死亡。